Цитофотометрия

Определение "Цитофотометрия" в Большой Советской Энциклопедии

Цитофотометрия (от цито..., фото... и ...метрия), один из методов количественной цитохимии, позволяющий определять химический состав клеток в гистологическом препарате по поглощению света клетками. Через препарат пропускают монохроматическое излучение (свет) в виде пучка, диаметр которого соизмерим с диаметром клетки или внутриклеточной структуры. Концентрацию (С) исследуемого вещества в клетке находят по Бугера — Ламберта — Вера закону: Ф = Ф₀×е^-kch, где Ф — интенсивность света после его прохождения через клетку; Ф₀ — интенсивность падающего на клетку света; k — удельный монохроматического поглощения показатель исследуемого вещества (рассчитанный на единицу его концентрации) при данной длине волны света; h — длина пути, проходимого светом в клетке (практически — толщина гистологического препарата). Найдя концентрацию вещества внутри клетки и измерив её объём, можно рассчитать общее количество этого вещества в клетке. Цитофотометрия разработана шведским гистологом Т. Касперсоном в 1936. Чувствительность метода порядка 10^-12 г. Точность Цитофотометрия снижается из-за ошибки измерения вследствие неравномерности распределения вещества внутри клетки; для предотвращения этой ошибки используют т. н. сканирующую, или Цитофотометрия при двух разных длинах волн излучения. Ультрафиолетовая (УФ) Цитофотометрия позволяет определять в неокрашенных препаратах количество нуклеотидов, нуклеиновых кислот, белков по естественному поглощению ими УФ-лучей. Шире распространена Цитофотометрия в видимой области спектра; при этом используют естественную окраску отдельных веществ или чаще искусственное окрашивание препаратов специфическими гистохимическими красителями, связывающимися с химическими компонентами клетки в определённых количествах. С помощью большинства красителей выявляют в клетке нуклеиновые кислоты, белки и их отдельные реактивные группы, а также определяют активность ряда ферментов.

Лит.: Бродский В. Я., Трофика клетки, М., 1966; Введение в количественную цитохимию, пер. с англ., М., 1969; Gaspersson Т., Cell growth and cell function, N. Y., 1950.
  Л. З. Певзнер.